不同降温温度对抗破伤风毒素抗体重组CHO工程细胞株生长及蛋白表达的影响

目的 摸索适合抗破伤风毒素抗体重组CHO工程细胞株生长和抗体蛋白表达的降温温度，为细胞培养工艺的建立提供参考。方法 在体积为125 mL的培养瓶中，按50万个/mL的初始密度接种CHO工程细胞种子，采用补料分批培养模式，在转速125 r/min, CO₂浓度5.0%,湿度80%的温控培养摇床中进行细胞培养。对照组培养温度设定为37℃恒温；试验组初始培养温度设定为37℃,待培养瓶中的细胞密度达到1 000万个/mL时，将培养瓶分别转到35℃、34℃和33℃的摇床继续培养。每日取样，分别检测培养液的活细胞密度、细胞活率、葡萄糖、乳酸、NH⁺₄、渗透压和抗体蛋白滴度。当细胞活率<80%时，停止培养。与对照组比较，选择细胞生长较好，代谢副产物浓度较低且抗体蛋白滴度最高的温度为最终降温温度。结果 对照组的最高活细胞密度为2 000万个/mL,试验组37℃转到35℃、37℃转到34℃和37℃转到33℃培养条件下的最高活细胞密度分别为2 210万、1 940万和1 890万个/mL;与对照组相比，试验组培养后期的细胞活率维持较高...