鹿茸富脯氨酸多肽-APRP基因融合表达载体的构建及表达 |
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引用本文: | 郭寰宇,董文博,曲晓波,史文婷,郭焱.鹿茸富脯氨酸多肽-APRP基因融合表达载体的构建及表达[J].现代生物医学进展,2016,16(23):4419-4422. |
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作者姓名: | 郭寰宇 董文博 曲晓波 史文婷 郭焱 |
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作者单位: | 长春中医药大学;吉林大学第一医院二部 |
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基金项目: | 十二五" 国家科技支撑项目(2011BAI03B02-2) |
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摘 要: | 目的:构建鹿茸富脯氨酸多肽(APRP)基因融合表达载体,并诱导表达融合蛋白GST-APRP。方法:以鹿茸顶端组织总c DNA为模板,PCR方法扩增目的片段,连接p MDTM18-T载体,转化E.coli DH5α进行TA克隆。酶切与测序鉴定合格后,将目的片段与p GEX-6P-1质粒连接,完成p GEX-6P-1-APRP融合表达载体的构建。利用原核表达系统进行初步诱导表达。SDS-PAGE蛋白电泳检测蛋白表达情况。结果:PCR成功扩增出目的基因片段,目的基因片段大小为216 bp。提取表达载体质粒经酶切及测序分析证实p GEX-6P-1-APRR融合表达载体构建成功。利用终浓度为0.5 m MIPTG诱导,融合蛋白成功表达,分子量为35 k Da。结论:目前利用基因工程技术获得特定的鹿茸多肽的报道很少。本研究结果表明,利用原核表达系统可在体外对鹿茸富脯氨酸多肽基因(APRP)进行融合表达,并且融合蛋白GST-APRP以可溶形式表达,有利于进一步研究APRP。这也为研究其他鹿茸多肽单体成分提供重要参考。
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关 键 词: | APRP GST-APRP 融合表达载体 诱导表达 |
Construction of Fusion Expression Vector and Inducible Expression of the
Antler Proline-rich Polypeptide-APRP |
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Abstract: | |
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Keywords: | APRP GST-APRP Fusion expression vector Inducible expression |
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