| 猪CuZnSOD基因启动子的克隆鉴定及分析 |
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| 作者姓名： | 石元 陈伟 曾勇庆 祝洪磊 徐正刚 张哲 杨云 张天阳 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018 |
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| 基金项目： | 国家转基因重大专项 (Nos. 2011ZX08006-002,2013ZX08006-002),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2008AA101008),山东省现代农业 (生猪) 产业技术体系建设专项,山东省农业良种工程重大项目 (No. 2011LZ013-03) 资助。 |
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| 摘 要： | 猪铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是一种重要的抗氧化酶,其功能已被广泛研究,但CuZnSOD基因的转录调控尚不明确。为了研究猪CuZnSOD基因的核心启动子区域,并对其转录调控机制进行探讨,运用PCR方法从猪基因组克隆CuZnSOD基因5′上游调控区853 bp的片段,然后通过巢式PCR方法获得5′末端逐渐缺失的启动子系列片段,并将这些片段定向插入到荧光素酶报告基因表达载体(pGL3-Basic)中。瞬时转染小鼠胚胎细胞(NIH/3T3),利用双荧光素酶报告基因检测不同长度启动子活性。检测结果显示,在CuZnSOD基因5′上游调控区-87 bp和-266 bp处分别存在2个潜在转录起始位点,-383 bp~+67 bp启动区活性最强,进一步缺失分析发现-75 bp~-32 bp区域内含有猪CuZnSOD基因转录所必需的基础启动子序列,其中存在多个潜在的转录因子结合位点,研究结果提示这些转录因子结合位点可能是参与CuZnSOD基因转录的重要调控序列。
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| 关 键 词： | 猪 CuZnSOD基因 启动子 双荧光素酶报告基因 |
| 收稿时间： | 2013-05-21 |
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