| 禽网状内皮组织增生症病毒p30-gp90串联表达蛋白及其免疫原性 |
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| 引用本文： | 陈瑞爱,李延鹏,郭凯,刘正伟. 禽网状内皮组织增生症病毒p30-gp90串联表达蛋白及其免疫原性[J]. 微生物学报, 2014, 54(3): 352-358 |
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| 作者姓名： | 陈瑞爱 李延鹏 郭凯 刘正伟 |
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| 作者单位： | 华南农业大学兽医学院，广东广州51000;中国农业科学院生物技术研究所，北京100081;华南农业大学兽医学院，广东广州51000;华南农业大学兽医学院，广东广州51000 |
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| 基金项目： | 重大动物疫病新型疫苗的关键技术研究与产业化(2011A090200117) |
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| 摘 要： | 摘要:【目的】研究禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis Virus，REV)群特异性抗原P30与囊膜糖蛋白gp90体外共表达蛋白的免疫原性，为研发新型REV 抗体诊断试剂盒提供基础。【方法】根据REV脾脏坏死病毒(spleen necrosis virus，SNV)株的前病毒基因组cDNA序列，设计合成2对引物，以pPB101质粒为模板，分别扩增REV p30基因和gp90基因片段。将PCR产物依次克隆入表达载体pET-28a(+)中，通过酶切鉴定和测序分析，筛选阳性重组克隆pET-p30-gp90。重组菌经异丙基硫代D-半乳糖苷( IPTG)诱导后，通过SDS-PAGE电泳分析表达情况，Western blot检测表达蛋白与特异性血清之间的反应性。制备表达蛋白的抗血清，以该抗血清与REV感染的鸡胚成纤维细胞( CEF)进行间接免疫荧光实验(IFA)，验证表达蛋白的免疫原性。【结果】经SDS-PAGE电泳后能观察到预期大小的表达条带，Western blot结果显示，重组蛋白能与REV抗血清反应。将表达产物纯化后免疫Balb/c小鼠，制备p30-gp90抗血清，该抗血清与REV感染CEF在IFA中呈现特异性荧光反应。【结论】体外串联表达REV p30-gp90蛋白，表达蛋白具有良好的免疫原性。
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| 关 键 词： | 关键词:禽网状内皮组织增生症病毒，p30，gp90，免疫原性 |
| 收稿时间： | 2013-07-16 |
| 修稿时间： | 2013-09-14 |
Immunogenicity of co-expressed p30-gp90 against Reticuloendotheliosis virus |
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| Ruiai Chen,Yanpeng Li,Kai Guo and Zhengwei Liu. Immunogenicity of co-expressed p30-gp90 against Reticuloendotheliosis virus[J]. Acta microbiologica Sinica, 2014, 54(3): 352-358 |
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| Authors: | Ruiai Chen Yanpeng Li Kai Guo Zhengwei Liu |
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