分枝杆菌HGMS2中类固醇C20-羟基脱氢酶的鉴定

分枝杆菌常被用作甾体药物中间体生产菌种，然而当前人们对其具体的甾醇降解机制仍然不是很清楚。为了获得C20-羟基甾药中间体，文章直接以RS为底物进行了转化，并通过对转化产物进行TLC、HPLC、LS-MS和核磁分析，初步确定分枝杆菌中存在类固醇C20-羟基脱氢酶（1DHC）参与的代谢途径。同时，基于生物信息学和结构生物学，通过序列和结构比对分析，最终从分枝杆菌中鉴定出了一个与类固醇C20-羟基脱氢酶同源性很高的基因。将该基因在大肠杆菌中异源表达，并对其功能活性进行分析，证明该基因所编码的酶和类固醇C20-羟基脱氢酶具有相同的功能活性。文章首次从分枝杆菌中鉴定出一种类固醇C20-羟基脱氢酶，使研究者对分枝杆菌甾醇代谢机制有了更深入的理解，同时也为新型甾药中间体的制备以及分枝杆菌的改造奠定了理论基础。