| 小鼠α1，2岩藻糖基转移酶基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 林蓓,齐藤真木子,岩森正男.小鼠α1，2岩藻糖基转移酶基因的克隆及表达[J].实验生物学报,2005,38(6):536-544. |
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| 作者姓名： | 林蓓 齐藤真木子 岩森正男 |
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| 作者单位： | [1]中国医科大学附属第二医院妇产科,沈阳110004 [2]日本东京大学医学部小儿科,日本东京113—8655 [3]日本近畿大学理工学部化学科,日本大阪577—8502 |
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| 摘 要： | 本文报告小鼠GDP岩藻糖：β半乳糖苷α1，2-岩藻糖基转移酶（α1，2-fucosyltansferase，α1，2-FT）基因的克隆，并进行功能鉴定。利用RT—PCR方法克隆小鼠α1，2-岩藻糖基转移酶基因编码区MFUT-II，测序后将其插入表达载体pcDNA3．1的多克隆位点，构建表达载体pcDNA3．1-MFUT-II；采用磷酸钙法将其转染于COS-7细胞进行表达，通过对底物特异性比较研究酶的性质；应用Northern印迹杂交法研究基因在小鼠组织中的表达情况；应用Southern印迹杂交法分析基因存在状态。结果证实MFUT-II为小鼠α1，2-岩藻糖基转移酶基因家族的新成员。含有一个完整的开放读码框。可编码347个氨基酸。其估计分子质量为39kDa，和小鼠日及Sec1基因具有序列同源性。分别与人类Se基因（79．O％）、大鼠Ratrrs（89％）基因、兔Rabbit FT-III基因（77％）具有较高的序列同源性。用MFUT-II基因转染的COS-7细胞具有α1，2-FT活性。MFUT-II可在多种组织中产生3．5kb大小的mRNA转录产物。基因Southern印迹杂交分析结果显示：基因MFUT-II仅为一个拷贝。这些结果证明MFUT-II为小鼠的Se基因。
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| 关 键 词： | α1 2-岩藻糖基转移酶 基因 克隆 表达 小鼠 |
| 收稿时间： | 2005-01-17 |
| 修稿时间： | 2005-01-172005-09-05 |
Cloning and expression of murine alpha1,2-fucosyltransferase gene] |
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| LIN Beil, SAITO Makiko, IWAMORI Masao.Cloning and expression of murine alpha1,2-fucosyltransferase gene][J].Acta Biologiae Experimentalis Sinica,2005,38(6):536-544. |
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| Authors: | LIN Beil SAITO Makiko IWAMORI Masao |
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| Institution: | 1 Department of Obstetrics and Gynecology, The Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110004 China;2 Department of Peditrics, Graduate Shool of medicine, University of Tokyo 7-3-1 Hongo, Bunkyo-ku, Tokyo 113-0003, 3 Department of Biochemistry, Faculty of Science and Technology, Kinki University, Higashiosaka, Osaka 577-8502 Japan |
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