一种水华蓝藻气囊的分离纯化及气囊结构蛋白的鉴定 |
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作者姓名: | 许柏英 苗娅 |
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作者单位: | 1. 重庆师范大学生命科学学院 重庆 401331; 2. 中国科学技术大学生命科学学院 安徽 合肥 230026),1. 重庆师范大学生命科学学院 重庆 401331 |
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基金项目: | 重庆市基础与前沿研究计划项目(No. cstc2015jcyjBX0142,cstc2016jcyjA0375);重庆市教委科学技术研究项目(No. KJ1500326);重庆师范大学博士科研启动基金项目(No. 15XLB009) |
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摘 要: | 【目的】从水华蓝藻铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa PCC 7806)的细胞中分离纯化出高纯度且完整的气囊,并对气囊的结构组成蛋白进行鉴定。【方法】采用渗透冲击与溶菌酶处理相结合的方法,进行多次低速离心提纯气囊,纯化所得气囊用负染色透射电镜观察气囊的纯度、完整度和形态。将纯化得到的气囊溶解后进行SDS-PAGE电泳,电泳后的蛋白条带运用LC-MS质谱法完成鉴定。【结果】从气囊的电镜照片可以看出提纯后的气囊纯度高,完整性好。气囊是两端呈锥状的圆柱体状,各气囊的直径大小一致,约120 nm,但长度不同,从约500 nm到1 500 nm不等。SDS-PAGE电泳和质谱法鉴定出气囊的两种主要结构组成蛋白Gvp A和Gvp C。【结论】这些研究对后续揭示气囊的精细结构和深入研究水华蓝藻浮力调节机制具有重要的意义。
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关 键 词: | 铜绿微囊藻 气囊 分离纯化 结构蛋白 电镜观察 质谱鉴定 |
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