绍鸭卵巢卵泡发育相关新EST的分离与表达 |
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引用本文: | 束刚,陈杰,倪迎冬,周玉传,赵茹茜. 绍鸭卵巢卵泡发育相关新EST的分离与表达[J]. 遗传学报, 2004, 31(10): 1095-1102 |
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作者姓名: | 束刚 陈杰 倪迎冬 周玉传 赵茹茜 |
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作者单位: | 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室,南京,210095 |
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基金项目: | 国家自然科学基金农业倾斜项目 (编号 :3 9770 5 40 )资助~~ |
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摘 要: | 采用银染mRNA差异显示方法从绍鸭卵巢等级卵泡中分离并筛选到 3个差异表达序列标签 (ExpressedSequenceTags ,ESTs)SXDF0 2 0 1(2 71bp)、SXDF0 2 0 2 (2 0 0bp)和SXDF0 2 0 3(173bp) ,通过测序和BLAST检索 ,发现SXDF0 2 0 1与GenBank中登录的所有物种的所有序列均无同源性 ,是在绍鸭卵巢卵泡发现的新EST ,现已登录GenBank(GenBank登录号 :CB0 72 6 2 9) ,而SXDF0 2 0 2和SXDF0 2 0 3则分别与GenBank公布的鸡的EST和肌胃肌球蛋白重链高度同源。用 5′ RACE将SXDF0 2 0 1延伸至 5 4 4bp ,经过BLAST再次检索 ,仍然未发现中度同源序列采用相对定量RT PCR方法进一步研究SXDF0 2 0 1和SXDF0 2 0 2在绍鸭组织中的时空特异性表达 ,发现这两个EST在产蛋高峰期绍兴鸭的下丘脑、垂体、肌肉、肝脏、脂肪等组织都有表达 ;SXDF0 2 0 1在 30日龄卵巢的表达水平显著高于 6 0 (P <0 0 5 )和 90 (P =0 0 15 )日龄 ;而SXDF0 2 0 2在卵巢发育的不同阶段的表达水平没有变化 ;SXDF0 2 0 1在卵巢卵泡颗粒层中的表达总体高于膜层 ,SXDF0 2 0 2在颗粒层中的表达F3 >F5>Fw(P <0 0 1) ,而在F1卵泡降至最低 (P <0 0 1) ,膜层中以Fw 卵泡表达水平最高 (P <0 0 1)。
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关 键 词: | 差异显示 绍兴鸭 卵巢卵泡 表达序列标签 |
文章编号: | 0379-4172(2004)10-1095-08 |
Isolation and Expression of Novel Expressed Sequence Tags (ESTs) from Ovarian Follicles of Shaoxing Ducks |
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Abstract: | |
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Keywords: | silver staining mRNA differential display Shaoxing duck ovarian follicles expressed sequence tags |
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