HIV—1gp41基因的高效表达及表达产物的纯化

为了获得高效表达的人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ１）ｇｐ４１蛋白，从而为ＨＩＶ１基因工程诊断抗原的国产化打下基础，用ＰＣＲ的方法从ＨＩＶ１全基因序列中扩增出编码ｇｐ４１Ｎ端的６９０ｂｐ片段。经酶切后，克隆到ｐＥＴ２８ａ载体中，再将重组质粒转化到表达宿主菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＩＰＴＧ诱导，高效表达出ｇｐ４１蛋白。间接ＥＬＩＳＡ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＳＤＳＰＡＧＥ电泳证实，该表达产物具有良好的抗原性和特异性，且表达量约占总菌体蛋白的４５％。重组蛋白经金属鏊合纯化，纯度达９９％。