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产PK和NRP类抗生素苦豆子内生放线菌分子筛选及抗生素类型鉴定
引用本文:祁鹤兴,赵映珺,李鹏,高媛,徐全智,顾沛雯.产PK和NRP类抗生素苦豆子内生放线菌分子筛选及抗生素类型鉴定[J].微生物学通报,2016,43(3):583-592.
作者姓名:祁鹤兴  赵映珺  李鹏  高媛  徐全智  顾沛雯
作者单位:1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021;2. 中国农业大学植物病理学系农业部植物病理学重点实验室 北京 100193,1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021,3. 宁夏大学 省部共建天然气转化国家重点实验室培育基地 宁夏 银川 750021,1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021,1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021,1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 750021
基金项目:宁夏回族自治区科技支撑计划项目(No. NG2013); 国家自然科学基金(No. 30960228)
摘    要:【目的】从19株苦豆子内生拮抗放线菌中筛选PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因阳性菌株,并对其产抗生素种类进行初步鉴定,为苦豆子内生放线菌资源的合理开发和利用提供理论依据。【方法】分别以PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因引物对19株拮抗菌株进行特异性扩增,筛选阳性菌株;以7种抗生素标准样品为对照,采用TLC和HPLC法对阳性菌株所产抗生素类型进行鉴定。【结果】PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因阳性菌株率分别为47.4%、10.5%和21.1%;9株内生放线菌发酵液中各有1个峰的洗脱时间与麦迪霉素的洗脱时间一致,菌株NDZKDS69的发酵液中有4个峰的洗脱时间分别与麦迪霉素、乙酰螺旋霉素、替考拉宁和土霉素标准样品的洗脱时间一致。【结论】苦豆子内生放线菌中链霉菌属(Strepomyces)菌株是大环内脂类、芳香环类和非核糖体多肽类抗生素的丰富菌源;分子指纹图谱和化学指纹图谱检测结果一致,且建立的TLC和HPLC法检测抗生素的方法简便、快捷、灵敏、重复性良好。

关 键 词:苦豆子内生放线菌,聚酮合酶,非核糖体多肽合成酶,分子筛选,高效液相色谱

Screening and identification of polyketide and non-ribosomal peptide antibiotics from endophytic actinomycetes of Sophora alopecuroides L.
QI He-Xing,ZHAO Ying-Jun,LI Peng,GAO Yuan,XU Quan-Zhi and GU Pei-Wen.Screening and identification of polyketide and non-ribosomal peptide antibiotics from endophytic actinomycetes of Sophora alopecuroides L.[J].Microbiology,2016,43(3):583-592.
Authors:QI He-Xing  ZHAO Ying-Jun  LI Peng  GAO Yuan  XU Quan-Zhi and GU Pei-Wen
Institution:1. School of Agriculture, Ningxia university, Yinchuan, Ningxia 750021, China;,2. The key Laboratory of Plant Pathology, Ministry of Agriculture and Department of Plant Pathology, China agriculture university, Beijing 100193, China,3. Breeding Base of National Key Laboratory of Natural Gas Conversion, Province and Ministry Common Construction, Ningxia university, Yinchuan, Ningxia 750021, China,1. School of Agriculture, Ningxia university, Yinchuan, Ningxia 750021, China,1. School of Agriculture, Ningxia university, Yinchuan, Ningxia 750021, China and 1. School of Agriculture, Ningxia university, Yinchuan, Ningxia 750021, China
Abstract:
Keywords:Endophytic actinomycetes of Sophora alopecuroides L    Polyketide synthase  Non-ribosomal peptide synthase  Molecular screening  High performance liquid chromatography
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