| 博尔纳病病毒X基因真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 孙岚,刘翠玉,纪羽婷,李玉军,李爱梅,魏兰兰,张凤民.博尔纳病病毒X基因真核表达载体的构建及鉴定[J].中国微生态学杂志,2015,27(4):379-381,385. |
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| 作者姓名： | 孙岚 刘翠玉 纪羽婷 李玉军 李爱梅 魏兰兰 张凤民 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学医学微生物学教研室,黑龙江省感染与免疫重点实验室,黑龙江省感染与免疫创新团队,黑龙江省普通高校病原学重点实验室,黑龙江哈尔滨 150081 |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金(QC2014C088);黑龙江省卫生和计划生育委员会科研课题(2012-759) |
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| 摘 要： | 目的构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)X蛋白真核表达载体,为BDV X蛋白的功能研究奠定基础。方法从BDV持续感染的人少突胶质瘤细胞(oligodentrocyte,OL)的总RNA中,通过逆转录和PCR获得BDV X基因的完整序列,将其连接到pc DNA6-myc-His(A)载体上,转化至E.coli感受态细菌后,提取质粒筛选阳性克隆,通过PCR法和DNA测序进行鉴定,并转染至OL细胞,通过Western blot方法验证重组蛋白的表达。结果测序鉴定目的基因序列正确插入至pc DNA6-myc-His(A)载体的酶切位点,PCR扩增的基因片段大小与目的基因相同,Western blot证明转染至OL细胞后可表达BDV X-His融合蛋白。结论成功构建了博尔纳病病毒X基因真核表达载体pc DNA6-myc-His(A)-BDV X。
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| 关 键 词： | 博尔纳病病毒 基因重组 序列测定 蛋白免疫印迹 |
Construction and identification of the eukaryotic expression vector of Borna disease virus X gene |
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| SUN Lan,LIU Cui-yu,JI Yu-ting,LI Yu-jun,LI Ai-mei,WEI Lan-lan and ZHANG Feng-min.Construction and identification of the eukaryotic expression vector of Borna disease virus X gene[J].Chinese Journal of Microecology,2015,27(4):379-381,385. |
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| Authors: | SUN Lan LIU Cui-yu JI Yu-ting LI Yu-jun LI Ai-mei WEI Lan-lan and ZHANG Feng-min |
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| Institution: | SUN Lan;LIU Cui-yu;JI Yu-ting;LI Yu-jun;LI Ai-mei;WEI Lan-lan;ZHANG Feng-min;Department of Microbiology,Harbin Medical University,Heilongjiang Key Laboratory of Immunity and Infection,Key Laboratory of Pathogenic Biology,Heilongjiang Higher Education Institutions; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Borna disease virus Gene cloning Sequencing Western blot |
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