新疆野苹果MsCBF1基因的克隆及表达分析

新疆野苹果是现代栽培苹果的祖先,对非生物胁迫具有很强的适应性,是非常珍贵的天然基因资源库。本研究以新疆野苹果RNA为模板,RT-PCR扩增出CBF1基因c DNA序列,命名为Ms CBF1。Ms CBF1基因完整开放阅读框ORF长660 bp,编码219位氨基酸,具有CBFs类转录因子典型的AP2保守结构域。亚细胞定位显示Ms CBF1蛋白作用于细胞核;转录激活活性分析显示Ms CBF1蛋白具有转录激活活性,其激活活性区域位于C端第166~219位氨基酸之间。基因表达分析显示,Ms CBF1基因响应盐(200 mmol·L~(-1 )Na Cl)和冷(4°C)胁迫诱导,不响应干旱(300 mmol·L~(-1)甘露醇)胁迫诱导。