| 一种新型的截短型转化生长因子βⅡ型受体在大肠杆菌中的表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 初彦辉,刘海峰,王小花,张羽飞,武艳,袁晓环.一种新型的截短型转化生长因子βⅡ型受体在大肠杆菌中的表达及活性鉴定[J].中国生物工程杂志,2009,29(8):33-37. |
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| 作者姓名： | 初彦辉 刘海峰 王小花 张羽飞 武艳 袁晓环 |
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| 作者单位： | 1. 牡丹江医学院黑龙江省抗纤维化生物治疗重点实验室 牡丹江 157011
2. 暨南大学生命科学与技术学院 广州 5106323
3.牡丹江医学院病原生物学实验室 牡丹江 157011 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，黑龙江省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 克隆人源的截短型转化生长因子βⅡ型受体（tTGF-βRⅡ），成功构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株。采用PCR技术扩增得到目的基因tTGF-βRⅡ，插入原核表达载体pGEX4T3的相应位点，并在大肠杆菌BL21（DE3）中获得高可溶性表达的重组蛋白，重组蛋白GST-tTGF-βRⅡ经Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化后，再经凝血酶酶切，然后经Glutathione-Sepharose 4B纯化获得目的蛋白tTGF-βRⅡ，SDS-PAGE分析表明：可以通过Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化得到GST-tTGF-βRⅡ，其分子量约37.0 KDa，和目的蛋白tTGF-βRⅡ，分子量为11.0 KDa。Western blot结果显示GST-tTGF-βRⅡ和tTGF-βRⅡ为特异性蛋白。运用基因工程的方法获得tTGF-βRⅡ目的蛋白，对瘢痕成纤维细胞增殖具有很好抑制作用。
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| 关 键 词： | 转化生长因子βⅡ型受体 瘢痕成纤维细胞 表达 纯化 |
| 收稿时间： | 2009-03-26 |
| 修稿时间： | 2009-05-09 |
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