沉默DNA-PKcs对细胞信号转导相关基因转录的影响 |
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引用本文: | 安静,徐勤枝,隋建丽,白贝,周平坤.沉默DNA-PKcs对细胞信号转导相关基因转录的影响[J].中国生物化学与分子生物学报,2005,21(5):648-654. |
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作者姓名: | 安静 徐勤枝 隋建丽 白贝 周平坤 |
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作者单位: | 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863)资助项目(No.2004AA221160),国家自然科学基金资助项目(No.30371232)~~ |
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摘 要: | 利用RNA干扰技术构建DNA-PKcs表达抑制细胞模型,探讨DNA-PKcs对HeLa细胞信号转导相关基因表达的调控作用.通过观察细胞对辐射及顺铂的敏感性,鉴定细胞表型变化.用寡核苷酸芯片检测细胞信号转导相关基因的转录谱,并用RT-PCR方法和SEAP检测系统进一步验证基因的表达变化.所筛选出的DNA-PKcs表达抑制细胞对辐射及顺铂的敏感性升高,15个与细胞信号转导相关的基因表达升高,其中7个是与干扰素信号转导反应相关的基因.8个表达下降,包括有细胞增殖分化相关基因,如NFAT.RT-PCR检测结果与芯片结果相一致,利用SEAT报告系统检测,进一步证实NFAT转录活性下调.实验结果表明,DNA-PKcs除了参与DNA修复外,还调控细胞信号转导相关基因的表达,而且大多与细胞增殖分化相关.
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关 键 词: | DNA-PKcs RNA干扰 基因芯片 细胞信号转导 转录活性 |
收稿时间: | 2005-10-20 |
修稿时间: | 2005年1月4日 |
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