| 表达猪瘟病毒石门株E2抗原的重组腺病毒构建及免疫性研究 |
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| 作者姓名： | 孙永科 杨玉艾 王养会 张彦明 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 陕西省重大科技攻关项目(2006KZ07-G2),国家自然科学基金项日(30471290) |
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| 摘 要： | 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组腺病毒Adeasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带CSFVE2基因的重组腺病毒基因组质粒pAdEasy-E2,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒pAd-E2,PCR证实E2基因已整合至腺病毒基因组中,Western blot结果检测到重组病毒转染293细胞中E2蛋白的表达。ELISA检测结果表明,pAd-E2能刺激小鼠产生高效价的抗体,也能刺激猪体产生抗体。将pAd-E2通过肌肉和皮下接种途径免疫商品化猪2次,21d后用1000倍TCID50CSFV强毒攻击。pAd-E2免疫组有1/4头死亡,而非重组腺病毒pAd-CMV免疫组和空白对照组全部死亡。该研究为研制猪瘟基因工程疫苗提供了有用的数据。
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| 关 键 词： | 腺病毒 猪瘟病毒 E2基因 同源重组 保护效果 |
| 文章编号： | 1000-8721（2007）02-0137-06 |
| 修稿时间： | 2006-06-272006-10-08 |
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