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钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析
引用本文:周细南,苏东晓,潘英文,张添元,张爱联.钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析[J].生物技术,2008,18(3):13-15.
作者姓名:周细南  苏东晓  潘英文  张添元  张爱联
作者单位:中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101
摘    要:目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白。方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58。该重组表达载体经SacI线性化后,电激转化入毕赤酵母GSll5,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株。经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析。结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用。结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达。为Calreticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础。

关 键 词:calreticulin-N58  毕赤酵母  分泌表达  生物活性

Expression of Calreticulin-N58 in Pichia pastoris and Its Activity Analysis
ZHOU Xi-nan,SU Dong-xiao,PAN Ying-wen,ZHANG Tian-yuan,ZHANG Ai-lian.Expression of Calreticulin-N58 in Pichia pastoris and Its Activity Analysis[J].Biotechnology,2008,18(3):13-15.
Authors:ZHOU Xi-nan  SU Dong-xiao  PAN Ying-wen  ZHANG Tian-yuan  ZHANG Ai-lian
Abstract:
Keywords:
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