TGF-β2在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化 的研究

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的作用。方法：无菌条件下 分离Wistar 大鼠股骨骨髓，采用全贴壁培养法纯化BMSCs。传6 代后，将细胞随机分为3 组，A组加入25 ng/mL TGF-β2在1%氧 浓度条件下培养；B 组加入25 ng/mL TGF-β2在21%氧浓度条件下培养；C 组仅加入含10%胎牛血清的DMEM-α培养液在1%氧 浓度条件下培养。3 周后，通过甲苯胺蓝染色检测细胞糖胺多糖，聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平。 结果：骨髓细胞经换液后贴壁聚集生长，形态均一，连续传代后形态无明显改变。分组培养第1 周，A、C 组生长速度低于B 组；第 2 周各组均出现不规则形态细胞，A、C 组细胞形态小于B 组；第3 周各组均可见透明样基质，以A组最明显。3 周后行甲苯胺蓝 染色，A 组细胞内外均可见丰富的蓝染颗粒，B、C 组染色较A 组略浅。A 组Ⅱ型胶原的表达相对量(1.246± 0.287) 高于B 组 (0.973± 0.365)、C组(0.802± 0.196)，差异有统计学意义(P＜0.05)；B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。A 组Aggrecan 的表达相对量 (0.833± 0.375)高于B组(0.724± 0.173)、C 组(0.602± 0.091)，差异有统计学意义(P＜0.05)；B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。结 论：TGF-β2联合低氧环境可明显促进骨髓基质干细胞分化为软骨细胞。