| 人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究 |
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| 引用本文： | 徐春娥,付玲,侯丽华,翁少洁,来大志,李健民,于婷,于长明,陈薇.人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究[J].中国生物工程杂志,2006,26(12):6-10. |
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| 作者姓名： | 徐春娥 付玲 侯丽华 翁少洁 来大志 李健民 于婷 于长明 陈薇 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病学研究所 信阳师范学院生命科学学院 信阳师范学院生命科学学院 军事医学科学院微生物流行病学研究所 军事医学科学院微生物流行病学研究所 信阳师范学院生命科学学院 军事医学科学院微生物流行病学研究所 信阳师范学院生命科学学院 军事医学科学院微生物流行病学研究所 |
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| 摘 要： | 3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白，分别主要由SARS基因组中ORF 3a 和ORF 7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构，除去了SV40启动子基因，获得了pGL3-Enhancer载体，将获得的IFN-β启动子基因连入载体中，构建了带有人IFN-β启动子基因的荧光素酶报告质粒IP-21，并且通过实验证明所构建的质粒在干扰素的诱导剂NDV的作用下能够表达荧光素酶活性，照度计检测荧光素酶活性增强，从而验证了所构建的重组质粒的有效性。为了观察SARS-CoV非结构蛋白3a和7a对干扰素诱生途径的影响，将IP-21瞬转入稳定表达有3a和7a蛋白的CHO细胞，通过荧光素酶的信号强弱对3a和7a的作用进行分析，结果表明SARS-CoV的3a和7a蛋白能够刺激荧光素酶的表达，即在体外的细胞实验中，3a和7a能有效地激活IFN-β的启动子部分。此结果对进一步研究3a和7a的功能以及对SARS-CoV的致病机制的进一步研究有一定意义。
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| 关 键 词： | 7a蛋白 IFN-β启动子 荧光素酶报告系统 SARS-CoV 3a蛋白 |
| 收稿时间： | 2006-07-06 |
| 修稿时间： | 2006-07-062006-11-07 |
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