鸡输卵管上皮细胞瞬时表达系统 |
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引用本文: | 刘亚兵,余慕贞,等.鸡输卵管上皮细胞瞬时表达系统[J].发育与生殖生物学报,2001,10(1):12-19. |
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作者姓名: | 刘亚兵 余慕贞 |
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作者单位: | 中国科学院动物研究所,北京100080 |
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摘 要: | 在开发利用生物反应器生产特定蛋白的研究中,若先用特异组织作原代培养,建立瞬时表达系统,对特定调控元件和融合基因进行分析,可大大缩短研究进程。本文首次报道用鸡输卵管上皮细胞原代培养,建立瞬时表达系统的方法。输卵管细胞体外培养(Fig.1-3),在二,三周时间内仍然保持分泌卵清蛋白的功能,当分泌功能减弱时,若地培液中添加激素,一般一周后大部分细胞又可恢复分泌功能(Fig.4),由于卵清蛋白是一种分泌蛋白,通过斑点免疫渗滤法可迅速简便的从培液中检测到(Fig.4)。为 验证培养细胞能否表达外源基因,在原代培养细胞中转染绿色荧光蛋白基因,可在细胞浆中显示绿色荧光(Fig.5)。说明这是一个有效而又方便的检测调控元件的瞬时表达系统。
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关 键 词: | 鸡 输卵管 上皮细胞 瞬时表达系统 |
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