人巨细胞病毒gp52蛋白与pp65蛋白融合表达及初步应用 |
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引用本文: | 李长贵,周铁群.人巨细胞病毒gp52蛋白与pp65蛋白融合表达及初步应用[J].微生物学杂志,1999,19(3):59-60. |
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作者姓名: | 李长贵 周铁群 |
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作者单位: | 中国药品生物制品检定所!北京,100050,中国药品生物制品检定所!北京,100050,中国药品生物制品检定所!北京,100050,中国药品生物制品检定所!北京,100050,中国药品生物制品检定所!北京,100050,中国药品生物制品检定所!北京,100050 |
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摘 要: | 建立以重组表达HCMV蛋白为抗原的检测试剂盒,提高试剂盒的敏感性及特异性。从病毒及质粒中分别扩增gp52(281~433aa,f1)及pp65(361~473aa,f2)2个片段,以不同酶切位点同时插入到pTrcHisB载体上,筛选正确的重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达。表达蛋白rp52~65占菌体总蛋白的30%,以包涵体的形式存在,分子量为35000.以金属螯合亲和层析(IMAC)及分子筛方法纯化表达蛋白,纯度达到96%,得率为22.9%。以间接法检测HCMVIgM阳性血清,敏感性达到90.4%(19/21)。融合蛋白具有良好的抗原性,可代替gp52及pp65作为HCMVIgM抗体检测试剂盒的包被抗原。
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关 键 词: | 人巨细胞病毒 融合表达 gp52及pp65 |
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