转hTNF-α基因在鱼腥藻中表达产物的提取及其初步纯化 |
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引用本文: | 牛黎莉,张芃芃,韩睿,冉亮,赵兴贵,宋东辉,邓元告,张越男,郭玉蓉,施定基.转hTNF-α基因在鱼腥藻中表达产物的提取及其初步纯化[J].生物技术通报,2006(2):88-92. |
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作者姓名: | 牛黎莉 张芃芃 韩睿 冉亮 赵兴贵 宋东辉 邓元告 张越男 郭玉蓉 施定基 |
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作者单位: | 1. 甘肃农业大学食品科学与工程学院,兰州,730070;天津科技大学海洋科学与工程学院,天津,300457 2. 中国科学院植物研究所,北京,100093 3. 天津科技大学海洋科学与工程学院,天津,300457 4. 甘肃农业大学食品科学与工程学院,兰州,730070 5. 天津科技大学海洋科学与工程学院,天津,300457;中国科学院植物研究所,北京,100093 |
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基金项目: | 天津市科委重点科技攻关项目(043182711) |
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摘 要: | 研究了转hTNF-α基因鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC 7120)中表达产物的最佳提取条件,并研究目标蛋白hTNF-α对温度耐受度和硫酸铵盐析的条件,对总蛋白和目标蛋白进行了检测。结果表明,hTNF-α的最佳溶出条件为:0.05 mol/L、pH7.5Tris-HCl缓冲液,NaCl的浓度为0.2 mol/L;当温度为55℃时,处理30min,其hTNF-α提取量下降不明显,回收率达到92.08%,可除去约40%的杂蛋白;先用饱和度为30%的硫酸铵沉淀杂蛋白,再用60%的硫酸铵沉淀目标蛋白,又可除去部分杂蛋白。
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关 键 词: | 人肿瘤坏死因子α 鱼腥藻7120 提取缓冲液 温度处理 硫酸铵沉淀处理 |
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