| Trx-NAP 5融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性检测 |
| |
| 引用本文： | 吴亚敏,邓莉,彭礼飞,杨陈,胡晶晶,付汉维.Trx-NAP 5融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性检测[J].生物技术,2007,17(1):11-14. |
| |
| 作者姓名： | 吴亚敏 邓莉 彭礼飞 杨陈 胡晶晶 付汉维 |
| |
| 作者单位： | 1. 广东医学院寄生虫学教研室
2. 广东医学院寄生虫学教研室;广东医学院药理学教研室,广东,湛江,524023 |
| |
| 摘 要： | 目的:用大肠杆菌表达获得重组线虫抗凝血肽5(rNAP 5),为研究开发NAP5的功能与应用提供原料来源。方法:将扩增的NAP5基因经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后与表达载体pET-32a连接。构建好的重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,分别经IPTG和乳糖诱导表达,并探讨诱导表达条件,分析表达产物的可溶性情况。表达产物经镍亲和纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(aPTT)检测体外抗凝活性。结果:成功构建了pET-32a/NAP5表达载体,IPTG和乳糖均能诱导目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中高效地可溶性表达。优化条件下每升LB培养基可获可溶性目的融合蛋白量达65.3mg。纯化的蛋白能明显延长PT及aPTT,7.0mg/L的蛋白平均约延长5.09倍aPTT,2.55倍PT。结论:在大肠杆菌中成功表达了具有很好生物活性的Trx-NAP5融合蛋白,为研究开发NAP5的功能与应用奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 线虫抗凝血肽5(rNAP 5) 融合蛋白 大肠杆菌 表达 |
| 文章编号： | 1004-311X(2007)01-0011-04 |
| 修稿时间： | 2006年11月13 |
Expression of Trx - NAP 5 Fusion Protein in E. coli and Its Activities Analysis |
| |
| WU Ya-min,DENG Li,PENG Li-fei,YANG Chen,HU Jing-jing,FU Han-wei.Expression of Trx - NAP 5 Fusion Protein in E. coli and Its Activities Analysis[J].Biotechnology,2007,17(1):11-14. |
| |
| Authors: | WU Ya-min DENG Li PENG Li-fei YANG Chen HU Jing-jing FU Han-wei |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | nematode anticoagulant peptide 5(NAP5) fusion protein Escherichia coli expressionP |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
