石防风原生质体遗传转化及抗除草剂植株的再生 |
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引用本文: | 王秀凤,杨爱芳.石防风原生质体遗传转化及抗除草剂植株的再生[J].Acta Botanica Sinica,1999,41(7):706-710. |
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作者姓名: | 王秀凤 杨爱芳 |
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作者单位: | 山东大学生命科学学院 |
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摘 要: | 以石防风(Peucedanumterebinthaceum(Fisch.)Fisch.exTurcz.)叶柄愈伤组织为材料建立以致密细胞团为主的悬浮培养物,用酶解法获得原生质体。用PEG法将拟南芥菜(Arabidopsisthaliana(L.)Heynh.)抗除草剂基因导入原生质体后进行液体浅层培养。转化细胞经除草剂chlorsulfuron筛选,通过胚状体途径产生抗性小植株。转化处理106个原生质体,以加入40~50μg/mL质粒DNA,PEG终浓度为10%,于1mL转化介质中,26℃黑暗下处理20min的效果最好。ctDNA的加入对转化结果无明显影响。分子杂交试验表明,突变的als基因已整合进转化植株的基因组中。转基因植株的细胞在脱分化过程中仍具有抗chlorsulfuron的能力;移栽成活的转基因小苗仍表现出抗除草剂特性,而未转化的植株在低浓度除草剂下即逐渐死亡。表明转入的als基因在石防风细胞内能够稳定表达。
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关 键 词: | 原生质体,遗传转化,als基因,chlorsulfuron,石防风 |
Genetic Transformation of Protoplasts from Peucedanum terebinthaceum and Regeneration of Herbicide_resistant Plantlets |
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Abstract: | |
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Keywords: | Protoplast Genetic transformation als gene chlorsulfuron Peucedanum terebinthaceum |
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