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PLK1基因沉默抑制HeLa细胞凋亡
引用本文:张敏,游泳,陈智超,肖娟,刘芳,仲照东,田蕾,邹萍. PLK1基因沉默抑制HeLa细胞凋亡[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2006, 22(12): 991-995
作者姓名:张敏  游泳  陈智超  肖娟  刘芳  仲照东  田蕾  邹萍
作者单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科,武汉,430022
摘    要:以高表达Polo样激酶1(Polo-like kinase 1,PLK1)的宫颈癌细胞系HeLa细胞为模型,观察针对PLK1基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对其凋亡和增殖的影响.设计并合成了针对PLK1的shRNA,将其导入构建的携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的RNAi(RNA interference)表达载体中.通过 RT-PCR和Western 印迹分别检测HeLa细胞PLK1基因和蛋白水平的表达,以流式细胞仪和PI-Hochest双染法测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖水平.成功构建了携带EGFP的RNAi表达载体pEGFP-H1.转染shRNA后,HeLa细胞PLK1的表达降低至30%.与对照组和空载体转染组相比,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显增加,其增殖活性则明显降低.本课题构建的RNAi表达载体便于观察靶基因的转染情况,且不影响H1启动子的体内转录.PLK1的基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡,抑制该细胞的增殖,有可能为未来肿瘤的治疗找到新的靶点和有效途径.

关 键 词:Polo样激酶1  RNA干扰  真核表达载体  HeLa细胞  凋亡  
收稿时间:2006-04-04
修稿时间:2006-04-04

PLK1 Gene Silencing Decreases Apoptosis of HeLa Cells
ZHANG Min,YOU Yong,CHEN Zhi-Chao,XIAO Juan,LIU Fang,ZHONG Zhao-Dong,TIAN Lei,ZOU Ping. PLK1 Gene Silencing Decreases Apoptosis of HeLa Cells[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2006, 22(12): 991-995
Authors:ZHANG Min  YOU Yong  CHEN Zhi-Chao  XIAO Juan  LIU Fang  ZHONG Zhao-Dong  TIAN Lei  ZOU Ping
Affiliation:InstituteofHematology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430022,China
Abstract:
Keywords:Polo-like kinase 1  RNA interference  eukaryotic expression vector  HeLa cell  apoptosis
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