| 大鼠低氧诱导因子-1α基因克隆和表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张振,王君,吕苗苗,肖志彬,张玉明,高昌俊,孙绪德.大鼠低氧诱导因子-1α基因克隆和表达载体的构建[J].现代生物医学进展,2010,10(14). |
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| 作者姓名： | 张振 王君 吕苗苗 肖志彬 张玉明 高昌俊 孙绪德 |
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| 基金项目： | 全军"十一五"军队基金 |
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| 摘 要： | 目的:对低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因进行克隆及载体构建,为进一步研究HIF-1基因转染骨髓基质细胞移植治疗脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据.方法:制备大鼠脊髓缺血再灌注模型,提取脊髓组织mRNA,进行逆转录聚合酶链式反应(RT-PR)合成HIF-1α cDNA,并对其进行PCR扩增,对PCR产物进行纯化及连接T载体、转化感受态和双酶切鉴定,并将HIF-1α克隆入pcDNA3.1载体.结果:PCR扩增的片段长度为2472bp与预期结果一致;利用BamHI和XbaI双酶切能够切出大小约2472bP的目的片段,与PCR产物片段大小相等,经测序证实无碱基改变.结论:成功克隆HIF-1α,并被构建到载体pcDNA3.1中,为进一步研究基因转染奠定了基础.
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| 关 键 词： | 低氧诱导因子-1α 脊髓缺血再灌注损伤 基因克隆 大鼠 |
Gene Clone and Construction of Expression Vecter of Hypoxia Inducible Factor-1α in Rats |
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| ZHANG Zhen,WANG Jun,LU Mian-miao,XIAO Zhi-bin,ZHANG Yu-ming,GAO Chang-jun,SUN Xu-de.Gene Clone and Construction of Expression Vecter of Hypoxia Inducible Factor-1α in Rats[J].Progress in Modern Biomedicine,2010,10(14). |
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| Authors: | ZHANG Zhen WANG Jun LU Mian-miao XIAO Zhi-bin ZHANG Yu-ming GAO Chang-jun SUN Xu-de |
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