测定T_4-RNA连接酶活力的新方法及tRNA单加反应条件的研究 |
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引用本文: | 吴仁龙,刘德富,谌章群,张魁榜,商金宝,蓝永强,丁晓华,姚曼华,高翔.测定T_4-RNA连接酶活力的新方法及tRNA单加反应条件的研究[J].生物化学与生物物理进展,1982(4). |
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作者姓名: | 吴仁龙 刘德富 谌章群 张魁榜 商金宝 蓝永强 丁晓华 姚曼华 高翔 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物化学研究所
(吴仁龙,谌章群,张魁榜,商金宝,蓝永强,丁晓华,姚曼华),北京大学生物系
(刘德富),中国科学院上海生物化学研究所(高翔) |
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摘 要: | 本文对T_4-RNA连接酶催化tRNA单加pCp的反应条件进行了探讨。tRNA单加pCp的反应在37℃进行1小时,产率一般可达80%以上,条件适当时可达定量产率。利用这个反应建立了一个T_4-RNA连接酶活力测定的新方法。单加活力单位定义为,在标准条件下,37℃,60分钟,催化tRNA单加pCp产生1 pmole产物的酶量为1单加活力单位。1单加活力单位约相当于0.58焦磷酸交换单位。用该方法进行T_4-RNA连接酶制备过程的活力测定表明,该方法适合于纯酶制剂的活力测定也适合于粗酶制剂的活力测定。
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