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棉铃虫β-catenin的多克隆抗体制备及在蛹脑中的表达研究
作者姓名:陈伟  徐卫华
作者单位:1.广东药学院生命科学与生物制药学院,广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广州 510006;2.中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州 510275)
基金项目:国家自然科学基金项目(31230066); 国家重点基础研究发展计划项目(2012CB114101)
摘    要:
β-catenin是Wnt/β-catenin信号通路的重要成员。本研究构建β-catenin的原核表达载体,成功地在大肠杆菌Escherichia coli中进行表达。镍柱纯化重组蛋白后免疫兔子,制备了抗棉铃虫β-catenin的多克隆抗体。ELISA和Western blot的方法检测抗体效价和抗体特异性,结果表明抗体的效价较高,特异性较好。最后应用该抗体调查了滞育和发育蛹脑中β-catenin的表达情况,从蛋白水平证实了发育蛹脑中β-catenin高于滞育蛹脑。本研究为后续研究棉铃虫β-catenin的功能以及Wnt/β-catenin信号通路在棉铃虫发育中的作用奠定了基础。

关 键 词:棉铃虫;β-catenin;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体
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