| 鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰 |
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| 引用本文： | 刘玉良,胡顺林,张艳梅,吴艳涛,刘秀梵,Weits Jutta,Lange Martina,黄勇,龙进学. 鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰[J]. 微生物学通报, 2005, 32(6): 1-6 |
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| 作者姓名： | 刘玉良 胡顺林 张艳梅 吴艳涛 刘秀梵 Weits Jutta Lange Martina 黄勇 龙进学 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009
2. 德国Friedrich-L(o)ffler研究所国家动物病毒病研究中心分子生物学实验室,瑞姆斯岛,德国 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（No.39893290）国家“973”项目（No.G19990199）. |
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| 摘 要： | 将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段，将其自身环化后获得约6．5kb的质粒。设计引物，利用基因定点突变技术，在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基，将此突变最终引入到原基因组cDNA克隆中。应用RT—PCR技术从尿囊液中扩增NDV基因组F／HN基因区域部分片段，利用限制性内切酶BsmBI将扩增片段连接，最终将原cDNA克隆中相应片段替换下。测序结果表明，原基因组cDNA克隆中特定位置碱基插入突变成功，F／HN基因区域碱基突变均得以纠正。以上cDNA克隆的修饰与替换为该毒株的反向遗传研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 鹅源新城疫病毒 基因定点突变 基因组cDNA克隆 改造 |
| 文章编号： | 0253-2654(2005)06-0001-06 |
| 收稿时间： | 2005-01-05 |
| 修稿时间： | 2005-03-23 |
Modification of the Full-length cDNA Clone of Newcastle Disease Virus of Goose Origin |
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| LIU Yu-Liang,HU Shun-Lin, ZHANG Yan-Mei, WU Yan-Tao, LIU Xiu-Fan, Romer-Oberdorfer Angela, Weits Jutta, Lange Martina. Modification of the Full-length cDNA Clone of Newcastle Disease Virus of Goose Origin[J]. Microbiology China, 2005, 32(6): 1-6 |
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| Authors: | LIU Yu-Liang HU Shun-Lin ZHANG Yan-Mei WU Yan-Tao LIU Xiu-Fan Romer-Oberdorfer Angela Weits Jutta Lange Martina |
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| Affiliation: | 1 Key Laboratory of Animal Infectious Diseases, Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009 ;2 Institute of Molecular Biology, Friedrich-Loeffler-Institutes. Federal Research Centre for Virus Diseases of Animals, D-17498 lasel Riems, Germany |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Newcastle disease virus of goose origin Site-directed mutagenesis Genomic cDNA clone Modification |
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