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| 斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶Ⅰ基因的克隆与表达 | |
| 作者姓名： | 刘韫滔 韩学凤 罗泽宇 邱玉峰 龙敏南 胡忠 |
| 作者单位： | 1. 汕头大学生物学系 广东汕头515063 2. 厦门大学能源研究院 福建厦门 361005 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No. 41076106); 广东省自然科学基金项目(No. S2011030005257); 广东省科技计划项目(No. 2009B090300346); 广东高校科技创新重点项目(No. CXZD1124) |
| 摘 要： | 【目的】克隆斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并实现其在大肠杆菌内的高效表达。【方法】利用RT-PCR技术克隆了斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并将egI基因克隆到原核表达载体中,构建了重组质粒pET32a-egI。【结果】转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明:重组表达产物的相对分子质量约为80 kD,与预期相符。重组表达的菌悬液,经破碎离心,取其上清液,进行纤维素酶活性染色,获得了活性条带。DNS法测得内切酶活力为2.56 IU/mL。【结论】构建了斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶Ⅰ的原核表达系统。 |
| 关 键 词： | 斜卧青霉L-06 内切葡聚糖酶Ⅰ 克隆 原核表达 |
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