| 重叠PCR合成HPV16E6、E7基因并构建植物表达双元载体 |
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| 引用本文： | 芦春斌,高忱.重叠PCR合成HPV16E6、E7基因并构建植物表达双元载体[J].生物技术通报,2011(4). |
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| 作者姓名： | 芦春斌 高忱 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所,广州,510632 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目国际合作项目，广东省科技计划社会发展项目 |
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| 摘 要： | HPV16型为主的多种HPV病毒可诱发机体发生宫颈癌等疾病,以重叠PCR法人工合成HPV16 E6、E7致癌基因的融合基因,以之为目的基因构建了无选择标记基因(Marker-Free)双元载体,期望转化番茄开发新型宫颈癌治疗性疫苗-转基因植物口服疫苗.通过生物信息学分析HPV16 E6、E7基因,设计并合成密码子优化的靶基因E6-E7融合基因;并在目的基因的上游引入分子佐荆LTB基因,与Kozak序列等表达元件相偶联,以提高目的基因在植物表达系统的表达水平、增强其诱导黏膜免疫的免疫原性.目前已构建pX6-LTB-E7和pX6-LTB-E7-E6两个番茄转化双元载体.采用番茄Marker-Free系统转化和表达HPV16 E6、E7目的基因可以在转化后代中剔除标记基因,从而消除由标记基因可能引起的转基因植物口服疫苗的安全性问题,为HPV转基因植物口服疫苗应用奠定基础.
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| 关 键 词： | 宫颈癌 重叠PCR |
Synthesizing Optimized HPV16 E6,E7 Genes and Construcing Binary Expressing Vector |
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| Lu Chunbin,Gao Chen.Synthesizing Optimized HPV16 E6,E7 Genes and Construcing Binary Expressing Vector[J].Biotechnology Bulletin,2011(4). |
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| Authors: | Lu Chunbin Gao Chen |
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| Institution: | Lu Chunbin Gao Chen(Institute of Reproductive Immunology,College of Life Science and Technology,Jinan University,Guangzhou 510632) |
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| Abstract: | HPV 16 and HPV18 are major virus types of cervical cancer-induced in women.The oncogeneous genes E6 and E7 of HPV167 were synthesized with overlapping PCR and to be constructed Marker-Free binary vectors for tomato to study plant-based edible vaccine.Optimized target genes were fused to regulatory factors,such as Kozak sequence.To enhance immunogenic activity,molecular adjuvant gene LTB was introduced at upstream end to construct two binary vectors,pX6-LTB-E7 and pX6-LTB-E7-E6.The Marker-Free transformation... |
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| Keywords: | HPV16 E6 E7 |
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