制备反向亲和层析柱纯化RV-Ag |
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作者姓名: | 曹茂开 白春祥 |
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作者单位: | 兰州军区总医院病毒室(曹茂开),兰州军区总医院病毒室(白春祥) |
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摘 要: | <正>风疹病毒(RV)是引起人类致畸的重要病原,由于其抗原性较弱,给诊断、研究带来困难,用反向亲和层析法纯化效果较好,本文现报告这一结果。 一、反向亲和层析柱的制备 (一)免疫原制备:选用RV培养常用敏感细胞株BHK_(21),先培养成单层,用HanK′s洗3次,低温(-20℃)冻融收集细胞,超声波粉碎处理后,离心(8,000r Pm10分钟)、取上清测蛋白,免疫原蛋白浓度为50mg/ml。 (二)兔免疫血清制备及抗体纯化:选2.5~3Kg家兔五只,经掌、背、耳静脉多点反复多次免疫(1~2mL/次,0.1~0.5m1/处),75天放血。EIA检测兔血清效
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关 键 词: | 风疹病毒 抗原 反向亲和层析 |
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