| 斧文蛤金属硫蛋白基因的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 蒋国萍,程雪艳,滕爽爽,柴雪良,林兴管,刘广绪,肖国强.斧文蛤金属硫蛋白基因的克隆与表达分析[J].水生生物学报,2016,40(5):914-920. |
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| 作者姓名： | 蒋国萍 程雪艳 滕爽爽 柴雪良 林兴管 刘广绪 肖国强 |
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| 作者单位： | 1. 浙江省海洋水产养殖研究所,温州325005;浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室,温州325005;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;2. 浙江省海洋水产养殖研究所,温州325005;浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室,温州325005;温州医科大学检验医学院,生命科学学院,温州325005;3. 浙江省海洋水产养殖研究所,温州325005;浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室,温州325005;4. 浙江省海洋水产养殖研究所,温州325005;浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室,温州325005;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;温州医科大学检验医学院,生命科学学院,温州325005;5. 浙江大学动物科学学院,杭州,310058 |
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| 基金项目： | 海洋公益性行业科研专项(201205021-5)，国家贝类产业技术体系(CARS-48)，国家自然科学基金面上项目(31372503)，水产种质资源平台运行服务(2015DKA30470)资助 Supported by Scientific Research Projects of Marine Public Welfare Industry(201205021-5)，National Shellfish Industry Technology System(CARS-48)，Project of the National Natural Science Foundation of China(31372503)，Aquatic Germplasm Resources Platform Operation Service(2015DKA30470) |
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| 摘 要： | 金属硫蛋白（Metallothionein，MT）是一类富含半胱氨酸的小分子蛋白质，参与机体重金属解毒、维持金属元素代谢平衡以及清除自由基等生理功能。为了解斧文蛤金属硫蛋白（Ml-MT）的分子生物学特征及其在重金属Cd2+胁迫下的响应机制，本文采用RACE技术从斧文蛤（Meretrix lamarckii）总RNA反转录产物中获得了636 bp的Ml-MT cDNA基因序列。该序列包含65 bp的5非编码区（UTR）和340 bp的3非编码区（UTR）以及231 bp的开放阅读框（ORF），可编码76个氨基酸；其中半胱氨酸占27%，不含芳香族氨基酸，含16个MT所特有的Cys-Xn-Cys结构，预测的分子量约为7.704 kD，理论等电点7.138。MT氨基酸序列比对分析表明:斧文蛤金属硫蛋白（Ml-MT）与丽文蛤（Meretrix lusoria）的相似性高达88%，与文蛤（Meretrix meretrix）的同源性为87%。实时荧光定量（qRT-PCR）检测MT在斧文蛤5种组织中均有表达，但存在组织特异性，其中内脏团表达量最高，其次依次为鳃丝、闭壳肌、外套膜、斧足。在Cd2+（0.13 mg/L）胁迫0、6h、12h、24h、48h、72h和96h下，斧文蛤内脏团MT呈现出不同程度的上调表达，具体表现为高-低-高-低的波浪式变化，除6h以外，其他时间点均与对照组存在极显著差异（P0.01）。本研究表明:MT基因在维护机体正常生理功能及斧文蛤抵御重金属Cd2+胁迫过程中发挥着重要的分子调控作用。
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| 关 键 词： | 斧文蛤 金属硫蛋白 基因克隆 表达分析 Cd2+ |
| 收稿时间： | 2015-09-07 |
CLONING AND EXPRESSION OF METALLOTHIONEIN GENE IN MERETRIX LAMARCKII |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Meretrix lamarckii Metallothionein Gene cloning Expression Cd2+ |
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