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山羊重组促卵泡素长效类似物基因在毕赤酵母中表达
引用本文:杨欢利,赵西彪,宋晓娟,丁家桐.山羊重组促卵泡素长效类似物基因在毕赤酵母中表达[J].微生物学报,2008,24(3):409-414.
作者姓名:杨欢利  赵西彪  宋晓娟  丁家桐
作者单位:扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009;扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009;扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009;扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009
基金项目:江苏省自然科学基金项目资助 (No. BK2005050)。
摘    要:为了获得长效FSH制剂, 利用重叠PCR技术将山羊FSH的a, b亚单位, 通过hCGb亚单位羧基末端延长肽(CTP)基因序列的连接, 构建成单链长效类似物基因FSHb-CTP-a。将其克隆至表达载体pPIC9K, 重组载体线性化处理后电转化至毕赤酵母GS115中, 经判型和G418筛选后获得高拷贝菌株His+Mut+。经甲醇诱导表达后, 进行SDS-PAGE和Western blot分析表明: 重组FSHb-CTP-a的转化子可以正确有效地表达目的蛋白, 分子量约为29 kD。放射免疫分析法(RIA)测定表达上清, 高拷贝转化子的平均表达量为91.849 mIU/mL, 显著高于低拷贝转化子的平均37.419 mIU/mL的表达量, 为FSH的结构研究和长效FSH制剂的生产奠定了基础。

关 键 词:山羊促卵泡素    长效类似物基因    毕赤酵母

Expression of Goat Follicle-stimulating Hormone Analogous Gene in Pichia pastoris
Huanli Yang,Xibiao Zhao,Xiaojuan Song and Jiatong Ding.Expression of Goat Follicle-stimulating Hormone Analogous Gene in Pichia pastoris[J].Acta Microbiologica Sinica,2008,24(3):409-414.
Authors:Huanli Yang  Xibiao Zhao  Xiaojuan Song and Jiatong Ding
Institution:College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
Abstract:
Keywords:follicular-stimulating hormone  long-acting analogous gene  Pichia pastoris
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