| 肺炎链球菌cps操纵子的启动子序列点突变可导致细菌荚膜缺失 |
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| 引用本文： | 王建敏,徐绣宇,马峰,徐红梅,王丽滨,邢燕,粟玉凤,张雪梅.肺炎链球菌cps操纵子的启动子序列点突变可导致细菌荚膜缺失[J].微生物学报,2015,55(6):780-787. |
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| 作者姓名： | 王建敏 徐绣宇 马峰 徐红梅 王丽滨 邢燕 粟玉凤 张雪梅 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016,重庆医科大学附属第一医院检验科，重庆400016,重庆医科大学附属第一医院，重庆400016,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016,重庆医科大学附属第一医院，重庆400016,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016,重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题(20135503110004) |
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| 摘 要： | 摘要:【目的】明确肺炎链球菌荚膜多糖合成操纵子的启动子序列出现的点突变313713 T→C是否可导致细菌荚膜缺失。【方法】Western blot检测肺炎链球菌突变株SPY1 (NC_008533.1 313713 T→C)荚膜多糖含量;实时定量荧光PCR分析荚膜多糖合成基因cps2A、cps2B、cps2C以及cps2D的表达量;构建重组质粒pEVP3-cps promoterD39和pEVP3-cps promoterSPY1，分别转化D39和SPY1菌株，通过β-半乳糖苷酶活性检测来验证转入的启动子序列对细菌荚膜合成的影响，并通过电镜观察荚膜结构和荚膜肿胀试验进一步验证。【结果】肺炎链球菌SPY1 的荚膜多糖含量较野生型显著下降，其相关基因cps2A、cps2B、cps2C以及cps2D的表达量较野生型D39均显著降低;与D39-pEVP3-cps promoterD39对比，D39-pEVP3-cps promoterSPY1的β-半乳糖苷酶活性下降了76%，与SPY1-pEVP3-cps promoterD39相比，SPY1-pEVP3-cps promoterSPY1的β-半乳糖苷酶活性下降了约79%;电镜结果显示，重组SPY1-pEVP3-cps promoterD39荚膜可恢复至野生型水平，并且重组D39-pEVP3-cps promoterSPY1 (NC_008533.1 313713 T→C)荚膜肿胀试验呈阴性。【结论】荚膜多糖合成操纵子的启动子序列点突变313713 T→C可导致荚膜多糖合成基因表达显著下调，从而引起菌株SPY1的荚膜显著减少甚至缺失。
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| 关 键 词： | 关键词:肺炎链球菌，荚膜，点突变 |
| 收稿时间： | 2014/10/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 1/5/2015 12:00:00 AM |
Identification of a point mutation in the promoter region of cps operon responsible for capsular polysaccharide deficiency in Streptococcus pneumniae SPY1 |
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| Jianmin Wang,Xiuyu Xu,Feng M,Hongmei Xu,Libin Wang,Yan Xing,Yufeng Su and Xuemei Zhang.Identification of a point mutation in the promoter region of cps operon responsible for capsular polysaccharide deficiency in Streptococcus pneumniae SPY1[J].Acta Microbiologica Sinica,2015,55(6):780-787. |
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| Authors: | Jianmin Wang Xiuyu Xu Feng M Hongmei Xu Libin Wang Yan Xing Yufeng Su and Xuemei Zhang |
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