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肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用
引用本文:王丽滨,徐红梅,吴凯峰,郑玉强,王建敏,马峰,张雪梅,尹一兵,张群.肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用[J].微生物学报,2015,55(6):732-738.
作者姓名:王丽滨  徐红梅  吴凯峰  郑玉强  王建敏  马峰  张雪梅  尹一兵  张群
作者单位:重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,遵义医学院第三附属医院检验科,贵州遵义563002,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学检验医学院,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016
基金项目:高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题———肺炎链球菌荚膜多糖cps基因座转录调控的分子机制研究(20135503110004)
摘    要:摘要:【目的】研究肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对肺炎链球菌荚膜多糖(CPS)的调控作用。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表达CcpA蛋白,使用Ni2+亲和层析的方法纯化蛋白。利用纯化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制备多克隆抗体;采用ELISA法测定抗CcpA抗体效价。随后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎链球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA与cps基因座启动子区域片段的结合。最后,构建ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株;利用ELISA法测定野生D39菌 株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株的荚膜多糖含量。【结果】Western blot结果显示CcpA蛋白在多种血清型的肺炎链球菌均有表达,CcpA蛋白可与cps基因座启动子区域结合,且呈剂量依赖性;ccpA基因缺失时,细菌CPS含量升高,回复表达CcpA蛋白后,CPS含量显著降低。【结论】CcpA是肺炎链球菌中一种保守表达的蛋白,可通过调节cps基因座启动子负性调控肺炎链球菌荚膜多糖的表达。

关 键 词:关键词:肺炎链球菌,ccpA基因,荚膜多糖,转录调控
收稿时间:2014/11/20 0:00:00
修稿时间:2015/1/16 0:00:00

Regulation effect of CcpA protein on the biosynthesis of capsular polysaccharide in Streptococcus pneumoniae
Libin Wang,Hongmei Xu,Kaifeng Wu,Yuqiang Zheng,Jianmin Wang,Feng M,Xuemei Zhang,Yibing Yin and Qun Zhang.Regulation effect of CcpA protein on the biosynthesis of capsular polysaccharide in Streptococcus pneumoniae[J].Acta Microbiologica Sinica,2015,55(6):732-738.
Authors:Libin Wang  Hongmei Xu  Kaifeng Wu  Yuqiang Zheng  Jianmin Wang  Feng M  Xuemei Zhang  Yibing Yin and Qun Zhang
Abstract:
Keywords:
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