| 整合型碱性蛋白酶基因工程菌中抗性基因的敲除* |
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| 引用本文： | 唐雪明, 邵蔚蓝, 王正祥, 方慧英, 诸葛健,.整合型碱性蛋白酶基因工程菌中抗性基因的敲除*[J].微生物学通报,2003,30(3):1-5. |
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| 作者姓名： | 唐雪明 邵蔚蓝 王正祥 方慧英 诸葛健 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036 |
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| 基金项目： | 教育部高等学校骨干教师项目资助(No 2 0 0 065) |
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| 摘 要： | 要：利用大肠杆菌载体pET—韶a和穿梭载体PHY3肋队构建了敲除载体p10c，通过DP4A变性技术和同源重组技术成功地敲除了整合型碱性蛋白酶基因工程茵BP旧1中的卡那霉素抗性基因(M)，得到11株敲除卡那霉素抗性基因的阳性克隆，并使产酶水平保持稳定。该方法的建立为基因敲除技术在工业微生物研究中应用提供了经验，并为微生物来源的转基因产品安全性的研究提供了模型。
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| 关 键 词： | 碱性蛋白酶 基因工程菌BP071 抗性基因 基因敲除 |
| 文章编号： | 0253-2654(2003)03-0001-05 |
| 修稿时间： | 2002年6月25日 |
STUDY ON RESISTANCE GENE KNOCK OUT FROM INTEGRATED ALKALINE PROTEASE GENE ENGINEERING STRAIN |
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| TANG Xue,Ming,SHAO Wei,Lan,WANG Zheng,Xiang,FANG Hui,Ying,ZHUGE Jian.STUDY ON RESISTANCE GENE KNOCK OUT FROM INTEGRATED ALKALINE PROTEASE GENE ENGINEERING STRAIN[J].Microbiology,2003,30(3):1-5. |
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| Authors: | TANG Xue Ming SHAO Wei Lan WANG Zheng Xiang FANG Hui Ying ZHUGE Jian |
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| Abstract: | The knock out vector pHK was constructed with E coli vector pET 28a and shuttle vector pHY300PL, by using denatured DNA and homologous recombination technique, the kanamycin resistance gene ( Kan r) from integrated alkaline protease gene engineering strain BP071 was knocked out successfully, and the 11 positive clones were obtained The yield of the best positive clone BP0715 was stable as same as BP071 The methods provided the good experience for the industrial microbiology research, and it was foundation for studying on the safety of genetically modified organisms |
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| Keywords: | Alkaline protease Gene engineering strain BP071 Resistance gene Knock out |
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