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借助计算机模建与缺失突变技术确定抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位
作者姓名:张巍  冯健男  沈倍奋
作者单位:军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
摘    要:钓取抗人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)抗体Z12重、轻链可变区(VH, VL)基因, 根据其氨基酸序列, 运用同源模建方法分别模拟VH和VL结构域的空间构象, 并搭建Fv片段的整体三维结构, 利用分子对接方法建立Fv/hTNF-α作用的复合物模型, 据此模型推测Z12抗体识别的表位为hTNF-α141~146位. 将hTNF-α分为N端1~91和C端92~157两段进行原核表达, 检测结果表明Z12抗体识别的抗原表位位于hTNF-α C端92~157区, 初步证实预测结果可靠. 进一步的实验研究表明, 当把hTNF-α141~146位氨基酸缺失后, Z12抗体识别该缺失体的能力几乎丧失, 提示此抗体特异性识别抗原分子141~146位氨基酸残基.

关 键 词:Fv  抗原表位  同源模建  缺失  人肿瘤坏死因子-α
收稿时间:2003-03-17
修稿时间:2003-03-17
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