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| 副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA的原核表达 | |
| 引用本文： | 李强,吴葵,张菊梅,吴清平,徐明芳.副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA的原核表达[J].生物技术通报,2012(1):89-93. |
| 作者姓名： | 李强 吴葵 张菊梅 吴清平 徐明芳 |
| 作者单位： | 1. 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所,广州510070;暨南大学生命科学技术学院,广州510632 2. 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所,广州510070;中国科学院南海海洋研究所,广州510301 3. 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所,广州,510070 4. 暨南大学生命科学技术学院,广州,510632 |
| 基金项目： | 广东省自然科学基金项目，广东省中国科学院全面战略合作专项 |
| 摘 要： | 副溶血性孤菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用.从副溶血性弧菌ATCC 17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA.测序后转化大肠杆菌B1L21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达状况,并通过6× His-Tag进行Western blotting检测.结果显示,经0.6 mmol/L IPTG诱导4h,目的基因以包涵体形式高效表达,表达的融合蛋白大小约为49 kD,与理论值相符(437 aa).表明副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA在大肠杆菌中成功表达,为后续寻找副溶血性孤菌群体感应信号分子,进一步探索副溶血性弧菌群体感应系统提供参考. |
| 关 键 词： | 副溶血性弧菌 群体感应 CqsA 原核表达 |
Prokaryotic Expression of the Quorum-sensing Protein CqsA from Vibrio parahaemolyticus |
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| Li Qiang , Wu Kui , Zhang Jumei , Wu Qingping , Xu Mingfang.Prokaryotic Expression of the Quorum-sensing Protein CqsA from Vibrio parahaemolyticus[J].Biotechnology Bulletin,2012(1):89-93. | |
| Authors: | Li Qiang Wu Kui Zhang Jumei Wu Qingping Xu Mingfang |
| Institution: | 1Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Culture Collection and Application,Guangdong Open Laboratory of Applied Microbiology,State Key Laboratory of Applied Microbiology,Ministry-Guangdong Province Jointly Breeding Base,South China,Guangdong Institute of Microbiology,Guangzhou 510070;2Life Science Department,Jinan University,Guangzhou 510632;3South China Sea Institute of Ocenology Chinese Academy of Sciences,Guangzhou 510301) |
| Abstract: | CqsA,a quorum-sensing-related protein in Vibrio parahaemolyticus,is a putative autoinducer synthase,and the autoinducer synthesized by CqsA maybe is a major regulator in quorum sensing system.cqsA gene was cloned from V.parahaemolyticus ATCC17802 and inserted into the expression vector pET-22b.After sequencing the recombinant vector pET22b-cqsA was transformed into Escherichia coli BL21 and induced by IPTG,and then the fusion protein was analyzed by SDS-PAGE and verified by Western blotting employed 6×His-Tag.The results showed that the pET22b-cqsA could be able to express efficiently in a form of inclusion body under the induction of 0.6 mmol/L IPTG for 4 h.The molecular weight of the fusion protein was 49 kD,and this result matched the theory value(437 aa).In this experiment,V.parahaemolyticus quorum-sensing protein CqsA was expressed correctly in E.coli BL21. |
| Keywords: | Vibrio parahaemolyticus Quorum sensing CqsA Prokaryotic expression |
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