肠出血性大肠杆菌O157∶H7 EspA和EspB蛋白的重组表达及其免疫效果

目的：通过DNA重组技术表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7的EspA和EspB蛋白，并分析它们的免疫保护性。方法：采用PCR技术从EHEC0157：H7基因组中扩增espA和espB基因，连接至pET-22b（4-）载体上，转化至宿主细胞大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达，用亲和层析纯化目的蛋白，SDS-PAGE测定其相对分子质量，免疫小鼠分析其免疫保护性。结果：重组espA和espB基因片段的测序结果与GenBank中的相应基因序列完全一致，一致性均为100％；得到了纯度为95％以上的重组EspA和EspB蛋白，免疫小鼠所得到的抗体效价均为10^6。结论：重组EspA和EspB蛋白获得了可溶性表达，表达的蛋白具有良好的免疫保护性，为进一步制备疫苗奠定了基础。