| 戊型肝炎病毒ORF1多聚蛋白的不同功能域在细胞内的定位 |
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| 引用本文： | 黄慧,郑子峥,赵敏,李婧娴,赖旺生,苗季,张军,夏宁邵.戊型肝炎病毒ORF1多聚蛋白的不同功能域在细胞内的定位[J].病毒学报,2011,27(3):195-201. |
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| 作者姓名： | 黄慧 郑子峥 赵敏 李婧娴 赖旺生 苗季 张军 夏宁邵 |
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| 作者单位： | 厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005;厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,厦门,361005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(30870514);国家自然科学杰出青年基金(30925030); 传染病重大专项(2008ZX10404) |
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| 摘 要： | 为了探讨戊型肝炎病毒多聚蛋白ORF1的多个功能域在宿主细胞中的表达和定位情况,我们首先将psk-HEV重组载体上的ORF1各功能域的编码序列克隆到绿色荧光蛋白载体pcDNA3.1-GFP上,构建成融合表达的重组质粒,并测序和酶切鉴定其构建成功。再通过Western-Blot验证各融合蛋白在细胞中正确表达,并用激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在细胞内的分布和定位。在Huh7细胞中,RdRp蛋白主要分布于细胞核内,HEL蛋白以囊泡状分布于细胞核周,MET蛋白以颗粒状存在于细胞核和细胞质中,PLP蛋白呈极性分布于细胞核周,X蛋白在细胞核和细胞质中均存在。各融合蛋白在细胞中的不同定位印证了对这些蛋白质的功能预测和体外研究结果,这为进一步研究HEV不同蛋白功能提供了支持。
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| 关 键 词： | HEV ORF1蛋白 ORF3蛋白 定位 |
Localization of functional domains of HEV ORF1 in cells |
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| Huang Hui,Zheng Zi-Zheng,Zhao Min,Li Jing-Xian,Lai Wang-Sheng,Miao Ji,Zhang Jun,Xia Ning-Shao.Localization of functional domains of HEV ORF1 in cells[J].Chinese Journal of Virology,2011,27(3):195-201. |
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| Authors: | Huang Hui Zheng Zi-Zheng Zhao Min Li Jing-Xian Lai Wang-Sheng Miao Ji Zhang Jun Xia Ning-Shao |
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| Institution: | HUANG Hui,ZHENG Zi-zheng,ZHAO Min,LI Jing-xian,LAI Wang-sheng,MIAO Ji,ZHANG Jun,XIA Ning-shao(National Institute of Diagnostics and Vaccine Development in Infectious Disease,School of Life Sciences,Xiamen University,Xiamen 361005,China) |
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| Abstract: | To investigate the expression and localization of various functional domains of ORF1 polyprotein and ORF3 protein of hepatitis E virus in host cells,the coding sequences of the various functional domains(RdRp,HEL,MET,PLP,X) of ORF1 were separately cloned into pcDNA3.1-GFP vectors for constructing the recombinant plasmids which were verified by enzyme digestion and sequencing.The exact expression of the fusion proteins were detected by Western Blot,and the distribution and localization were observed by the l... |
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| Keywords: | hepatitis E virus ORF1 polyprotein ORF3 protein localization |
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