| 斑马鱼cdk7和cyclin H基因的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 储琳,刘清云,钱旻,严缘昌,李逸平.斑马鱼cdk7和cyclin H基因的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定[J].细胞生物学杂志,2006,28(6):849-854. |
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| 作者姓名： | 储琳 刘清云 钱旻 严缘昌 李逸平 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，华东师范大学生命科学学院，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 上海200031华东师范大学生命科学学院，上海200062，上海200031，上海200062，上海200031上海高校模式生物E-研究院，上海200031，上海200031 |
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| 基金项目： | 上海教育委员会E-研究院建设计划项目资助(No.E03003)~~ |
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| 摘 要： | 构建了两个表达斑马鱼cdk7(基因片段)和cyclinH(基因全长)的重组质粒,分别转化大肠杆菌BL21进行原核表达,所得的CDK7和cyclinH两个融合蛋白均以包涵体形式存在。经SDS-PAGE分离,切下含有目的蛋白条带的凝胶冻成干粉,分别免疫新西兰大耳兔,制备并纯化了分别抗CDK7和抗cyclinH的两个多克隆抗体。经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析检测,确定获得了两种具有较高效价的特异性多克隆抗体。免疫荧光组织化学结果显示,CDK7和cyclinH这两个蛋白质均普遍存在于斑马鱼胚胎动物极的各个细胞中。
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| 关 键 词： | 斑马鱼 CDK7 cyclinH 原核表达 抗血清 |
| 修稿时间： | 2006年2月6日 |
Prokaryotic Expreesion and Polyclonal Antibodies Preparation of cdk7 and cyclin H in Zebrafish |
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| Lin Chu,Qing-Yun Liu,Min Qian,Yuan-Chang Yan,Yi-Ping Li.Prokaryotic Expreesion and Polyclonal Antibodies Preparation of cdk7 and cyclin H in Zebrafish[J].Chinese Journal of Cell Biology,2006,28(6):849-854. |
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| Authors: | Lin Chu Qing-Yun Liu Min Qian Yuan-Chang Yan Yi-Ping Li |
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| Abstract: | Expression vectors of CDK7 and cyclin H gene in zebrafish were constructed and transformed into E. coli BL21 separately for IPTG induced expression. The results showed that both fusion protein were ex- pressed in the form of inclusion body. Fusion proteins were isolated and then lyophilized to raise the polyclonal antisera against CDK7 and cyclin H respectively by immunizing New Zealand rabbits. The antisera were purified and characterized by ELISA, Western blotting and immunofluorescence-staining. The results showed that the antibodies had high titer, affinity and specificity. |
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| Keywords: | zebrafish CDK7 cyclin H prokaryotic expression antiserum |
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