| 一株海洋微藻的鉴定及其原生质体制备条件优化 |
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| 引用本文： | 张莉,丁涓,郝宇晨,叶城,蒲洋.一株海洋微藻的鉴定及其原生质体制备条件优化[J].中国生物工程杂志,2018,38(11):42-50. |
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| 作者姓名： | 张莉 丁涓 郝宇晨 叶城 蒲洋 |
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| 作者单位： | 鲁东大学生命科学学院 烟台 264000 鲁东大学农学院 烟台 264000 |
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| 基金项目： | * 鲁东大学科技项目(29350301);鲁东大学科研启动基金(ly2014041);山西省煤基重点科技攻关项目资助项目(FT2014-01) |
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| 摘 要： | 从烟台海滨水域分离出一株海洋单细胞微藻。通过形态学鉴定和18S r DNA基因序列分析确定该株真核微藻属于四爿藻属(Tetraselmis sp.),命名为138号藻种。利用Central Composite法的Box-Behnken实验设计优化了此藻株的原生质体备条件。获得了以原生质体制备率为目标函数的三元二次回归方程:Y_1=88. 30-0. 19X_1+2. 44X_2+2. 28X_3-0. 95X_1X_2-3. 13X_1X_3+3. 78X_2X_3-9. 85X_1~2-7. 95X_2~2-7. 22X_3~2。得到最优制备条件:混合酶比例纤维素酶∶果胶酶为5∶2;混合酶浓度为4. 5%(纤维素酶浓度为2. 7%,果胶酶浓度为1. 8%);缓冲液pH为6. 4,最高理论制备率81. 5%。经过3次平行试验,实际得到的原生质体制备率为80. 5%,与模型预测值的误差为1. 24%。绿色荧光蛋白报告基因瞬时表达检测了所制备原生质体的转化能力。
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| 关 键 词： | 分子鉴定 原生质体制备 响应面优化 |
| 收稿时间： | 2018-07-13 |
Identification of a Marine Microalgae and Optimization of Protoplast Preparation |
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| Li ZHANG,Juan DING,Yu-cheng HAO,Cheng YE,Yang PU.Identification of a Marine Microalgae and Optimization of Protoplast Preparation[J].China Biotechnology,2018,38(11):42-50. |
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| Authors: | Li ZHANG Juan DING Yu-cheng HAO Cheng YE Yang PU |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Molecular identification Protoplast preparation Response surface optimization |
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