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马铃薯多酚氧化酶基因克隆及反义表达载体构建
引用本文:王清 王蒂 黄俊生 郭安平. 马铃薯多酚氧化酶基因克隆及反义表达载体构建[J]. 西北植物学报, 2003, 23(10): 1745-1749
作者姓名:王清 王蒂 黄俊生 郭安平
作者单位:1. 甘肃农业大学,农学院,兰州,730070
2. 中国热带农业科学院,生物技术国家重点实验室,海口,571101
基金项目:国家高技术研究发展计划 “ 863”计划项目(2001AA241131 )
摘    要:
从甘农薯1号马铃薯试管苗叶片中提取总DNA,根据Genebank报道的马铃薯多酚氧化酶基因(PPT32)序列,设计合成了带有BamHⅠ、SacⅠ特定酶切位点的2对特异引物,通过PCR获得l840bP和476bP的扩增产物。测序结果表明,l840bp的扩增产物与Oenebank中发表的序列一致,476bp的扩增产物正是欲扩增的马铃薯多酚氧化酶基因的同源片段。将2个扩增产物反向连接到表达载体PC3中,通过双酶切鉴定后,按直接导入法实现反义基因表达载体质粒向农杆菌EHA105的导人;并经PCR鉴定证明,此质粒已整合到农杆菌Ti上。

关 键 词:马铃薯 PPO基因克隆 反义基因表达载体构建
文章编号:1000-4025(2003)10-1745-05
修稿时间:2003-03-05

Cloning of potato polyphenol oxidase gene and constructing of antisense PPO expression vector
Abstract:
Keywords:potatoes  polyphenol oxidase gene clone  anti-sense expression vector construction
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