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牛凝乳酶基因在毕赤酵母中的重组表达
作者姓名:张莉  姜媛媛  张健  杨贞耐
作者单位:中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心,长春,130033
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA10Z306);;吉林省科技发展计划项目(Nos.20060219,20080228);;现代农业产业技术体系建设专项资金(农科教发[2007]14号)资助~~
摘    要:通过PCR技术从克隆载体pMD18T-Prochy上扩增牛凝乳酶原基因,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-Prochy,线性化后电转化毕赤酵母GS115,经PCR和测序鉴定凝乳酶原基因成功插入到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行凝乳酶的表达,SDS-PAGE分析证明重组凝乳酶的分子量约为37 kD,培养基上清液中凝乳酶的活性为12.2 SU/mL。本研究首次应用毕赤酵母表达牛凝乳酶,在培养基中获得分泌表达的重组凝乳酶,为干酪工业提供了新型及优良的凝乳酶来源。

关 键 词:牛凝乳酶  分泌表达  毕赤酵母  
收稿时间:2009-04-20
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