嗜热子囊菌JCM12803来源的双功能木聚糖/纤维素酶 |
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作者姓名: | 李晓丽 涂涛 姚斌 谢响明 罗会颖 |
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作者单位: | 1 北京林业大学 生物科学与技术学院,北京 100083;2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081,1 北京林业大学 生物科学与技术学院,北京 100083,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081 |
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基金项目: | 中国农业科学院协同创新项目 (No. CAAS-463 XTCX2016011-04-5) 资助。 |
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摘 要: | 纤维素和木聚糖的充分利用对于生物燃料的生产是非常重要的。文中利用PCR的方法从嗜热子囊菌Thermoascus crustaceus JCM12803中克隆到一个新颖的双功能木聚糖/纤维素酶基因Tcxyn10a,并将其在毕赤酵母Pichia pastoris GS115中实现高效异源表达。经过蛋白纯化和酶学性质研究分析,TcXyn10A的最适pH值和最适温度分别为5.0和65-70℃,能够在酸性至碱性(pH 3.0-11.0)条件下和60℃下保持稳定;对榉木木聚糖、小麦阿拉伯木聚糖、羧甲基纤维素钠和地衣多糖均有降解活性,比活分别为(1 480±26)U/mg、(2 055±28)U/mg、(7.4±0.2)U/mg和(10.9±0.4)U/mg;同源建模结构以及分子对接试验表明,双功能酶TcXyn10A只含有单一催化结构域,且木聚糖底物与纤维素底物共用一条催化通道。文中为探索双功能酶结构与其功能的关系提供了很好的素材。
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关 键 词: | 嗜热子囊菌JCM12803 双功能酶 木聚糖酶 纤维素酶 |
收稿时间: | 2018-02-22 |
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