| 产黄青霉谷胱甘肽S-转移酶基因PcgstA的克隆与鉴定 |
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| 作者姓名： | 王富强 郑桂珍 赵颖 任志红 贾茜 贺建功 于军 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院北京基因组研究所,北京,101300;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院研究生院,北京,100039;华北制药集团新药研究开发有限责任公司,石家庄,050015
2. 华北制药集团新药研究开发有限责任公司,石家庄,050015
3. 中国科学院北京基因组研究所,北京,101300 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划资助项目(2002BA7112A16)~~ |
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| 摘 要： | 从青霉素工业生产菌产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)中首次克隆了一个谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因,定名为PcgstA.该基因的开放阅读框长840bp,含有两个内含子,编码一个238氨基酸残基的蛋白质.其推断的氨基酸序列与一些已经鉴定的丝状真菌GST具有50%左右的序列一致性.PcgstA的完整编码区经RT-PCR扩增、验证,插入原核表达载体pET11a,转化大肠杆菌BL21(DE3)-RP菌株,表达得到重组PcGSTA蛋白.酶活测定证实,重组PcGSTA具有GST活性,其对底物CDNB(1-chloro-2,4-dinitrobenzene)的比活为(0.159±0.031)μmol/(min·mg).利用TaqMan探针法,对PcgstA的表达情况进行了比较.结果表明,在添加了侧链前体苯乙酸的青霉素生产培养基中,PcgstA的表达水平和在不含苯乙酸培养基中的表达相比明显下调,显示了该基因与苯乙酸代谢的关系.
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| 关 键 词： | 产黄青霉 谷胱甘肽S-转移酶 苯乙酸 |
| 收稿时间： | 2006-05-26 |
| 修稿时间： | 2006-06-05 |
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