|
|||||
|
|
| 人肝细胞生长因子(hdHGF)基因在毕赤酵母中的分泌表达 | |
| 作者姓名： | 邓兵兵 方宏清 赵洪亮 刘志敏 薛冲 |
| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所, |
| 摘 要： | 研究了hdHGF基因在毕赤酵母中的表达 .以人胎盘mRNA为模板 ,经逆转录、重叠PCR获得hdHGF全长和成熟基因片段 .将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115,筛选mut+ 表型 ,经甲醇诱导可实现rhdHGF的分泌表达 .经摇瓶培养筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析和Western印迹试验表明 ,产物分子量约为80kD ,5L发酵罐高密度培养已使生物量达 13 5g L(干重 ) ,发酵液上清总蛋白量为 8 0g L ,电泳结果表明rhdHGF表达水平为总蛋白的 12 3 % . |
| 关 键 词： | 肝细胞生长因子 巴斯德毕赤酵母 分泌表达 |
| 收稿时间： | 2001-10-20 |
| 修稿时间： | 2000-12-06 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》下载全文 | |