| 一种新型的油樟叶片总RNA提取方法 |
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| 引用本文： | 林娜,高继海,艾涛波,范林洪,王胜华,陈放.一种新型的油樟叶片总RNA提取方法[J].中国生物工程杂志,2013,33(5):107-111. |
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| 作者姓名： | 林娜 高继海 艾涛波 范林洪 王胜华 陈放 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室 成都 610064;2. 宜宾学院生物研究所 宜宾 644000 |
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| 基金项目： | 国家"十二五"科技支撑重点项目，四川省教育厅项目，四川省科技厅项目 |
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| 摘 要： | 以油樟叶为试材,比较Trizol法、皂土法、CTAB法、Tris-SDS-异硫氰酸胍法等传统方案提取总RNA,发现效果都不理想.本文针对油樟叶片富含油脂、多酚、多糖的特点,开创性地使用了一种改良的总RNA提取流程:首次增加预处理液、乙酸乙酯抽提来减少油脂、多酚和多糖对裂解液粘稠度的影响,提取过程中使用二氯甲烷代替三氯甲烷增加对疏水性杂质的清除效果,使用混合型高盐溶液多次脱糖,结果表明使用改良的新型方法获得的油樟叶片总RNA条带清晰无明显降解,测得的A260/A280和OD260/OD230均在2.0左右,产物得率约580 μg/g,通过RT-PCR扩增出了油樟18S rRNA基因序长为113bp的特异条带,说明这种改良的新型方法获得的RNA完整性、纯度和产率都远高于常规RNA提取方法,研究探索出一种新型油樟叶片总RNA的提取方法.
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| 关 键 词： | 油樟 总RNA 改良方法 乙酸乙酯 二氯甲烷 混合型高盐 |
| 收稿时间： | 2012-12-17 |
A Novel Method of Total RNA Extraction from Leaves of Cinnamomum longepaniculatum |
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| LIN Na,GAO Ji-hai,AI Tao-bo,FAN Lin-hong,WANG Sheng-hua,CHEN Fang.A Novel Method of Total RNA Extraction from Leaves of Cinnamomum longepaniculatum[J].China Biotechnology,2013,33(5):107-111. |
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| Authors: | LIN Na GAO Ji-hai AI Tao-bo FAN Lin-hong WANG Sheng-hua CHEN Fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cinnamomum longepaniculatum Total RNA Modified method Ethyl acetate Dichloromethane High concentration of mixed salt |
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