| 麦芽四糖淀粉酶基因优化表达及酶学性质分析 |
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| 引用本文： | 赵云,朱蓓霖,汪正华,周杰,吴自荣,黄静.麦芽四糖淀粉酶基因优化表达及酶学性质分析[J].中国生物工程杂志,2013,33(5):100-106. |
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| 作者姓名： | 赵云 朱蓓霖 汪正华 周杰 吴自荣 黄静 |
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| 作者单位： | 华东师范大学生命科学学院 上海 200241 |
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| 摘 要： | 麦芽四糖淀粉酶是一种新型外切淀粉酶,从淀粉的非还原末端特异地顺序切割第4个α-1,4糖苷键,产物为麦芽四糖,广泛应用于食品、医疗保健等领域.对来自嗜糖假单胞菌(Pseudomonas saccharophila)的麦芽四糖淀粉酶基因序列进行优化,优化前后基因序列同源性达75％.将优化合成的成熟肽基因克隆至原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白主要以包涵体形式存在.包涵体经变性、复性、多步纯化,获得有活性的麦芽四糖淀粉酶.将麦芽四糖淀粉酶与不同来源的淀粉水解反应,结果表明,该酶能与7种不同来源的淀粉反应产生单一的麦芽四糖.经SDS-PAGE电泳,DNS法和硅胶板薄层色谱分析法(TLC)进行酶学性质分析,结果表明麦芽四糖淀粉酶的分子量约为57kDa,纯化后的酶液最适反应温度为45℃,最适反应pH为8.0.研究结果为麦芽四糖淀粉酶的研究和开发提供依据和参考.
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| 关 键 词： | 麦芽四糖淀粉酶 嗜糖假单胞菌 基因优化 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2012-10-15 |
Optimization of Expression and the Character Ization of a G4-amylase Enzyme |
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| ZHAO Yun,ZHU Bei-lin,WANG Zheng-hua,ZHOU Jie,WU Zi-rong,HUANG Jing.Optimization of Expression and the Character Ization of a G4-amylase Enzyme[J].China Biotechnology,2013,33(5):100-106. |
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| Authors: | ZHAO Yun ZHU Bei-lin WANG Zheng-hua ZHOU Jie WU Zi-rong HUANG Jing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | G4-amylase enzyme Pseudomonas saccharophila Gene optimization Characterization |
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