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一株人源性轮状病毒的分离及适应性培养
引用本文:李松,张光明,吴晋元,尹娜,易山,米锴,曹颖,李杨,孙茂盛.一株人源性轮状病毒的分离及适应性培养[J].中国生物工程杂志,2013,33(4):9-14.
作者姓名:李松  张光明  吴晋元  尹娜  易山  米锴  曹颖  李杨  孙茂盛
作者单位:1. 中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所 云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心 云南省重大传染病疫苗研发实验室 昆明 650118;2. 昆明医科大学 昆明 650031
基金项目:国家"863"计划资助项目
摘    要:目的:研究轮状病毒野毒株的分离方法、组织培养适应条件及相应生物学性质.方法:对收集的样品采用胶体金、PCR、PAGE进行轮状病毒定性检测.阳性样品按常规方法处理并进行组织培养分离,对不同传代样品做基因组图谱、基因序列、病毒增殖动力学分析评价,采用轮状病毒P8]G1型阳性血清进行病毒中和鉴别试验.结果:通过检测为A组轮状病毒,基因组为4∶2∶3∶2排列,基因分型G1P 8]型,在MA104细胞中传代后转至Vero细胞上适应培养可观察到CPE;电镜观察可见典型轮状病毒形态.毒株在Vero细胞上增殖到第10代,复制稳定,且感染性滴度达到7.25 log CCID50/ml,增殖高峰为96h.中和鉴别试验证实病毒培养液只包含轮状病毒,无其他病毒污染.结论:从腹泻样品中分离得到一株人源轮状病毒毒株,命名为ZTR-68株,该分离株具有良好的组织培养适应性,遗传稳定性,为进一步研究其生物学性质和疫苗制备提供了基础.

关 键 词:轮状病毒  分离  适应性培养  Vero细胞  
收稿时间:2012-11-06

Isolation Human Rotavirus Strains and Adaptive Culture
LI Song,ZHANG Guang-ming,WU Jin-yuan,YIN Na,YI Shan,MI Kai,CAO Ying,LI Yang,SUN Mao-sheng,LI Hong-jun.Isolation Human Rotavirus Strains and Adaptive Culture[J].China Biotechnology,2013,33(4):9-14.
Authors:LI Song  ZHANG Guang-ming  WU Jin-yuan  YIN Na  YI Shan  MI Kai  CAO Ying  LI Yang  SUN Mao-sheng  LI Hong-jun
Abstract:
Keywords:Rotavirus  Screened  Adaptive culture  Vero cells  
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